При экстракции растворителями удается выделить и часть связанного или компартментализованного ауксина. Чтобы избежать действия расщепляющих ауксины ферментов и предотвратить фотолитические процессы, работают при возможно низких температурах (например, 5°С) и в темноте. Полученный экстракт подвергают процедуре многоступенчатой очистки, включающей, например, тонкослойную и колоночную хроматографию; только после этого производится собственно качественное и количественное определение ауксинов.[ ...]
Высокоспецифичным и не требующим сложной предварительной очистки методом для определения ИУК является флуориметрия. Однако в этом случае нужно сначала перевести ИУК с помощью ангидрида уксусной кислоты в а-пирон (рис. 2.12, Е), флуоресценцию которого измеряют при 490 нм после возбуждения светом с длиной волны 440 нм. Количество ИУК в испытуемом экстракте рассчитывают по шкале, составленной путем измерения флуоресценции растворов с известным содержанием ИУК.[ ...]
Поскольку в ходе многоступенчатой очистки могут теряться существенные количества гормона, для оценки потерь во многие пробы добавляют какой-нибудь «внутренний стандарт», например меченую ИУК или другое очень близко родственное соединение, количество которого тоже измеряют в конце опыта. Потерю эндогенной ИУК приравнивают к процентной убыли внутреннего стандарта.[ ...]
Рисунки к данной главе:
Аналогичные главы в дргуих документах:
Вернуться к оглавлению
