Подобные отличия были найдены также при сравнении вируса некроза табака и выделенной из него РНК (опыта проводились на фасоли и на N. glutinosa). Если инокулумом служила РНК, то устойчивость инфекционных центров начинала расти непосредственно после инокуляции; если жо использовался интактиый вирус, то росту устойчивости предшествовал лаг-период, продолжавшийся 2—4 ч [934]. При этом было отмечено, что самые первые некрозы, вызываемые как РНК, так и интактным вирусом, появляются одновременно, однако некрозы, вызываемые свободной РНК, достигают максимального числа и нормального вида раньше, чем те, которые возникают при инокуляции интактным вирусом. Различие во времени появления максимума некрозов достигало 4 ч (фиг. 23).[ ...]
Было показано, что при инокуляции свободной РИК появление новых вирусных частиц можно обнаружить на несколько часов раньше, чем при инокуляции интактным вирусом (например, ВТМ [541] или витэусом некроза табака [934]).[ ...]
При другом прямом подходе к этой проблеме листья табака заражали ВТМ, реконструированным из меченных 14С белковых субъединиц и немеченой РНК [1550, 1551] (тем самым исключались трудности, связанные с присутствием меченых продуктов деградации РНК). В экстрактах листьев, полученных через 10 мин после инокуляции, около 25% вирусного белка обнаруживалось в верхней зоне градиента плотности сахарозы, четко отделяясь от основной зоны вируса; количество это возрастало в течение 5—9 ч. На первоначальное быстрое освобождение белка оболочки не влияли низкая температура или циклогексимид. Таким образом, этот процесс, но-видимому, не зависит от предсуществующих или индуцированных вирусом ферментов. Главная трудность как в этом, так и в описанном выше эксперименте оказалась связанной с тем, что в лучшем случае только около 0,01% иноку-лума успешно инфицирует клетки. Поэтому основная часть исследуемых РНК и белка, очевидно, представляла собой избыток инокулума, который не был удален при отмывании листа. Предпринимались также попытки наблюдать процесс «раздевания» вируса в электронном микроскопе [389]; однако до сих пор такие попытки закапчивались неудачей.[ ...]
Итак, представляется вероятным, что некоторые вирусные частицы денротешшзируются в течение нескольких минут после инокуляции. Это предположение подтверждается результатами описанных выше опытов с радиоактивным ВТМ, а также тем фактом, что самые ранние некрозы, вызываемые ВТМ, совпадают но времени появления с самыми ранними некрозами, вызываемыми РНК ВТМ [934]. По-видимому, существует период продолжительностью в несколько часов, во время которого отдельные-интактные вирусные частицы утрачивают белковую оболочку и либо вызывают инфекцию, либо инактивируются.[ ...]
Рисунки к данной главе:
| Скорость появления местных нейронов, вымываемых вирусом тжрояа табака ( --х) п его нуклеиновой кислотой (® —®) па листьях фасоли (при 25 °С) [934]. |
![Скорость появления местных нейронов, вымываемых вирусом тжрояа табака ( --х) п его нуклеиновой кислотой (® —®) па листьях фасоли (при 25 °С) [934].](/static/pngsmall/830185196.png) |