![При другом прямом подходе к этой проблеме листья табака заражали ВТМ, реконструированным из меченных 14С белковых субъединиц и немеченой РНК [1550, 1551] (тем самым исключались трудности, связанные с присутствием меченых продуктов деградации РНК). В экстрактах листьев, полученных через 10 мин после инокуляции, около 25% вирусного белка обнаруживалось в верхней зоне градиента плотности сахарозы, четко отделяясь от основной зоны вируса; количество это возрастало в течение 5—9 ч. На первоначальное быстрое освобождение белка оболочки не влияли низкая температура или циклогексимид. Таким образом, этот процесс, но-видимому, не зависит от предсуществующих или индуцированных вирусом ферментов. Главная трудность как в этом, так и в описанном выше эксперименте оказалась связанной с тем, что в лучшем случае только около 0,01% иноку-лума успешно инфицирует клетки. Поэтому основная часть исследуемых РНК и белка, очевидно, представляла собой избыток инокулума, который не был удален при отмывании листа. Предпринимались также попытки наблюдать процесс «раздевания» вируса в электронном микроскопе [389]; однако до сих пор такие попытки закапчивались неудачей.](/static/pngsmall/830185196.png)
При другом прямом подходе к этой проблеме листья табака заражали ВТМ, реконструированным из меченных 14С белковых субъединиц и немеченой РНК [1550, 1551] (тем самым исключались трудности, связанные с присутствием меченых продуктов деградации РНК). В экстрактах листьев, полученных через 10 мин после инокуляции, около 25% вирусного белка обнаруживалось в верхней зоне градиента плотности сахарозы, четко отделяясь от основной зоны вируса; количество это возрастало в течение 5—9 ч. На первоначальное быстрое освобождение белка оболочки не влияли низкая температура или циклогексимид. Таким образом, этот процесс, но-видимому, не зависит от предсуществующих или индуцированных вирусом ферментов. Главная трудность как в этом, так и в описанном выше эксперименте оказалась связанной с тем, что в лучшем случае только около 0,01% иноку-лума успешно инфицирует клетки. Поэтому основная часть исследуемых РНК и белка, очевидно, представляла собой избыток инокулума, который не был удален при отмывании листа. Предпринимались также попытки наблюдать процесс «раздевания» вируса в электронном микроскопе [389]; однако до сих пор такие попытки закапчивались неудачей.
Скачать страницу
[Выходные данные]
![При другом прямом подходе к этой проблеме листья табака заражали ВТМ, реконструированным из меченных 14С белковых субъединиц и немеченой РНК [1550, 1551] (тем самым исключались трудности, связанные с присутствием меченых продуктов деградации РНК). В экстрактах листьев, полученных через 10 мин после инокуляции, около 25% вирусного белка обнаруживалось в верхней зоне градиента плотности сахарозы, четко отделяясь от основной зоны вируса; количество это возрастало в течение 5—9 ч. На первоначальное быстрое освобождение белка оболочки не влияли низкая температура или циклогексимид. Таким образом, этот процесс, но-видимому, не зависит от предсуществующих или индуцированных вирусом ферментов. Главная трудность как в этом, так и в описанном выше эксперименте оказалась связанной с тем, что в лучшем случае только около 0,01% иноку-лума успешно инфицирует клетки. Поэтому основная часть исследуемых РНК и белка, очевидно, представляла собой избыток инокулума, который не был удален при отмывании листа. Предпринимались также попытки наблюдать процесс «раздевания» вируса в электронном микроскопе [389]; однако до сих пор такие попытки закапчивались неудачей.](/static/pngbig/830185196.png)