Растительные клетки можно выращивать в культуре несколькими способами: выращивают либо целые органы (например, корни или верхушки стеблей), либо ткань каллюса, либо, наконец, клеточные суспензии. Все эти способы были испробованы при изучении репликации вирусов, однако результаты оказались неутешительными (если не считать некоторых микроскопических исследований). Количество вируса, продуцируемого в культуре ткани, обычно намного ниже, чем в интактных зеленых листьях.[ ...]
Бесклеточные системы с успехом используются при изучении репликации вирусов животных и бактерий. Предпринималось много попыток приспособить их также и для изучения вирусов растений. Были испробованы: 1) системы, включающие клеточные оргапеллы, окруженные мембранами; 2) неочищенные системы, не содержащие таких оргаиелл; 3) системы, содержащие частично очищенные ферменты и нуклеиновые кислоты из инфицированных растений; 4) бесклеточные системы, полученные не из растений, а из других организмов (обычно из бактерий) и содержащие в качестве информационной РНК рибонуклеиновую кислоту фитопатогенных вирусов.[ ...]
Однако в том виде, в каком они применялись, эти системы так и не дали возможности получить какие-либо определенные результаты. Объясняется это, вероятно, несколькими причинами. Во-первых, в растительных тканях, обычно присутствуют фенолы; они не только создают затруднения при выделении вирусов (гл. III), но также инактивируют ферменты в тканевых экстрактах. Во-вторых, в растительных тканях широко распространены нуклеазы, которые быстро инактивируют PIIK, если их но удалить или не подавить их активность. В-третьих, наличие у растений целлюлозных клеточных стенок означает, что для разрушения клеток требуются довольно жесткие методы. Между тем хлоропласта — хрупкие органеллы, и потому многие препараты, используемые в качестве бесклеточпых систем, загрязнены их фрагментами, которые очень трудно удалить. Наконец, в-четвертых, клетки взрослых, полностью развитых листьев имеют крупные вакуоли, содержимое которых может повреждать цитоплазматические структуры при разрушении клеток еще до того, как сыграют свою роль защитные вещества, присутствующие в экстрагирующей среде.[ ...]
Вернуться к оглавлению