До того как Холмс [814] предложил метод подсчета местных поражений, единственным способом определения инфекциоиности, имевшимся в распоряжении исследователей, было заражение нескольких групп растений образцами различного разведения и последующая регистрация растений с системным поражением. Этот способ занимает много времени и требует гораздо большего числа растений для получения надежных данных. Однако в отдельных случаях такой метод определения инфекциоиности используется и сейчас, например в отношении вирусов, которые не имеют растений-хозяев с хорошо выраженной местной некротической реакцией, или вирусов, переносимых насекомыми.[ ...]
Иногда можно оценить скорость, с которой вирус передвигается из одной части растения в другую, путем отбора многих небольших кусочков ткани, не содержащих вируса вовсе или содержащих его в небольших количествах. Изолированные образцы ткани затем инкубируют, чтобы: дать возможность присутствующему в них вирусу размножиться и накопиться таким образом в количество, достаточном для определения, после чего присутствие или отсутствие в них вируса выявляют либо по иифекциоппости, либо каким-то другим методом. Подобного рода процедура была использована Фреем, и Мэтьюзом 1,571] для определения времени, прошедшего после инокуляции, в течение которого клетки:, распределенные под эпидермисом листа табака, инфицируются ВТМ. Они удаляли эпидермис с ипокулированной части листа и вырезали затем диски из нижележащей ткани, которые инкубировали в течение определенного времени. По относительному числу инфицированных дисков можно судить о времени, в течение которого вирус передвигается в расположенные под эпидермисом клетки мезофилла.[ ...]
При определении инфекдионпости вирусов, которые ие передаются механическим путем, но имеют насекомых-переносчиков, для оценки относительного количества вируса можно использовать процент удачных передач инфекции, осуществленных с помощью насекомых. Насекомые могут получать вирус (перед подкормкой на здоровых растениях) через мембрану на содержащих вирус растворах или в результате инъекции насекомым таких растворов [268, 439, 1243, 1717, 1900). Результаты, полученные в экспериментах, в которых насекомые кормились на инфицированной ткани, отражают, вероятнее всего, различия в доступности вируса для насекомых, а не в его концентрации в ткани или в органе. Все эти методы трудоемки и осложняются биологической изменчивостью как у насекомых, так и у растения-хозяина. Например, на результаты может влиять продолжительность времени, необходимого для кормления насекомого на испытуемом растении. Кроме того, насекомые могут погибать в различное время в ходе эксперимента на опытных растениях. Если для каждого такого растения используется больше чем одно насекомое, для оценки полученных результатов требуется более сложная статистика. Все эти трудности ограничивают широкое применение описываемого метода, однако таким путем удалось получить ценную информацию в отношении некоторых интересных вирусов (например, вируса раневых опухолей).[ ...]
Вернуться к оглавлению