Для подготовки пробы при проведении ТСХ-анализа, включающей извлечение анализируемых компонентов из исследуемого объекта, находят применение двухфазные слои, которые в виде готовых пластинок поставляются различными фирмами. Анализируемые растворы наносят на слой предварительного концентрирования, а сам хроматографический процесс проходит на основном слое. При этом необходимо обеспечить такие условия, чтобы мешающие компоненты не определялись наряду с анализируемыми веществами. Для этого проводят предварительную (первичную) очистку пробы (дистилляцию, экстракцию, сублимацию, осаждение), включающую различные приемы концентрирования. Следует отметить, что требования к очистке образца в тонкослойной хроматографии менее жесткие, чем в других хроматографических методах. Полученный образец содержит меньшее число компонентов, но в процессе концентрирования вследствие близких физико-химических характеристик вместе с интересующими исследователя соединениями могут содержаться и посторонние вещества [76].[ ...]
Конечными процедурами очистки и подготовки пробы являются обычно электрофорез и (или) хроматографическое разделение. Если матрица липо-фильная, адсорбционная очистка может быть проведена на силикагеле, оксиде алюминия, флорисиле, полиамидном сорбенте. Липофильную матрицу элюируют неполярным растворителем, при этом анализируемое вещество удерживается в концентрированной форме на колонке и элюируется позднее. Если далее необходимо провести фракционирование, то элюенты используют в соответствии с элюотропными рядами, проводя таким образом групповое разделение. Если матрица гидрофильная, все липофильные компоненты, присутствующие в водной матрице, поглощаются липофильной фазой. Для селективной очистки разработаны фазы, обладающие наряду с липофильными и ионообменными свойствами. Такие сорбенты известны под названием ро рИеге ЯР-18САТ [77].[ ...]
Преимущество пост-хроматографической дериватизации в ТСХ по сравнению с ВЭЖХ — в значительно большей гибкости метода, позволяющего, например, за счет последующей пропитки пластин в специальных растворах значительно увеличить чувствительность флуоресценции.[ ...]
Кроме специальных химических реагентов, образующих флуоресцентные производные с исследуемыми соединениями, в ТСХ используют пропитку пластин после ТСХ в различных растворах или выдерживание в парах каких-либо веществ для возбуждения или стабилизации флуоресценции, а также увеличения ее интенсивности.[ ...]
Окрашенные вещества обнаруживаются визуально. При проведении полу-юличественных измерений обученный аналитик может делать оценку с точно-тью до 10%. С появлением вариантов, гарантирующих достоверность резуль-■атов анализа, этот метод детектирования стал использоваться гораздо реже.[ ...]
Имеются специальные средства, усиливающие флуоресценцию некоторых ющесгв. Многие вещества, не флуоресцирующие и не фосфоресцирующие в /Ф-свете при комнатной температуре, становятся видимыми при температуре юикого азота (на пластину наливают жидкий азот и освещают УФ-светом). Существует много химических реагентов, которые превращают нефлуоресци-эующие вещества в флуоресцирующие при обработке до или после ТСХ.[ ...]
Аналогичные главы в дргуих документах:
| См. далее:Тонкослойная хроматография |
| См. далее:Тонкослойная хроматография |