Количественные методы в ТСХ можно разделить на две группы: 1) извлечение с пластины адсорбента с зоной вещества (пятном) с последующим определением его количества независимыми методами (газовая хроматография, масс-спектрометрия, ИК-спектроскопия и др.); 2) определение количества вещества непосредственно на пластине [2, 3].[ ...]
Первый вариант предпочтительнее, так как после предварительного выделения (фракционирования) из всей сложной пробы более узкой фракции (группы) целевых компонентов они могут быть с высокой достоверностью идентифицированы и определены количественно методом газовой хроматографии, масс-спектрометрии, ИК-спектроскопии или их комбинаций. Помимо высокой точности количественного определения, свойственной, в частности, газовой хроматографии, в этом случае очень высока и надежность результатов идентификации (см. главу V). Такой вариант анализа чаще всего применяется в экологической аналитической химии при использовании в качестве одного из методов предварительного разделения компонентов сложной смеси загрязнений тонкослойной хроматографии.[ ...]
Второй вариант (прямой анализ) применяется реже, особенно в случае сложных смесей загрязнений. Методы второй группы подразделяются на две подгруппы: измерение (или визуальная оценка) размера пятна на ТСХ-пластинке (площадь зоны или ее длина) и инструментальные методы определения концентрации целевых компонентов в пятне (сканирование пластины после ТСХ с регистрацией показаний детектора) [1, 6, 7].[ ...]
Для определения разделенных соединений непосредственно на пластинке ее опрыскивают реагентом (см. раздел 10.3), который через некоторое время образует с определяемым соединением окрашенные или флуоресцирующие вещества, концентрации которых количественно определяют денситометром. Этот метод включает сканирование пятна (хроматограммы) в проходящем или отраженном свете, который затем попадает в фотоумножитель. Разность в интенсивности падающего и проходящего или отраженного света в виде электрического сигнала регистрируется на графике. Высота пика является мерой интенсивности пятна. Градуировочный график строят в координатах: масса вещества — площадь пика, причем точность измерения площади пятна денситометром не менее 2—5% [2].[ ...]
В некоторых случаях (например, в полевых условиях при отсутствии другой аппаратуры) применяют полуколичественный метод визуального сравнения величины пятна с нанесением на пластину одновременно с анализируемым образцом известного количества стандартного раствора. В отдельных случаях точность такой оценки может достигать 20—25%, но чаще всего, особенно в условиях лаборатории, предпочтение отдается гораздо более точным сканирующим методам — оптическим (отражение, пропускание, отражение—пропускание, флуориметрия и др.) [6, 7].[ ...]
В последнем случае строят градуировочный график, например, зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации целевых компонентов в растворе, который можно использовать для количественного определения загрязняющих веществ в экологических пробах. На рис. 11.46 изображен такой график для определения нефтепродуктов в поверхностных водах (см. также раздел 10.7.2).[ ...]
Как следует из градуировочного графика на рис. 11.46, применяя флуоресцентное детектирование (см. раздел 3), в воде, загрязненной нефтепродуктами, можно не только определить их количественно, но и установить тип нефтепродукта (мазут, дизельное топливо, керосин и т.п.), что позволяет определить источник загрязнения.[ ...]
Тем не менее следует помнить, что наиболее надежные результаты качественного и количественного анализа сложных смесей загрязнений можно получить лишь в случае проведения анализа по первому варианту, то есть после извлечения разделенных веществ изТСХ-пластинки и их идентификации и определения одним из инструментальных методов (см. выше), например, с помощью газовой хроматографии.[ ...]
Рисунки к данной главе:
| Зависимость длины вол-ны возбуждения флуоресценции с максимальной интенсивностью (Хех нм) от концентрации нефтепродуктов (мг/л) |
 |
Аналогичные главы в дргуих документах:
| См. далее:Количественный анализ в тонкослойной хроматографии |