Определенные трудности для быстрого и эффективного выделения энтерококков из воды связаны с малой энергией их роста на обычных питательных средах. Поэтому в среды, используемые для обнаружения энтерококков в воде, обязательно добавляют углеводы (глюкоза, лактоза, мальтоза), дрожжевые препараты (экстракты, лизаты, диализаты, автолизаты). В качестве питательной основы используют, помимо мясного питательного агара, мясные триптические перевары, экстракты из сердца, мозгов, протеозные и триптозные пептоны и пептиды. Небольшое содержание энтерококков в воде по сравнению с кишечными палочками и другой сапрофитной микрофлорой требует применения высокоэлективных сред, в которых полностью подавлялся бы рост грамотрицательной микрофлоры, а также посторонней грамположительной — микрококков, стафилококков, споровых бактерий, сарцин. В ряде случаев требуется подавить рост других стрептококков, например, Sir. iac-tis, особенно при исследовании пищевых продуктов.[ ...]
Ускорение и упрощение методов определения энтерококков в воде шли по нескольким направлениям: создание оптимальных условий на первом этапе анализа титрационными методами, чтобы сократить время накопления энтерококков; подбор более эффективных подтверждающих сред, исключающих ложные результаты и не-иихидимость дальнейшего подтверждения наличия энтерококков; использование метода прямого посева для количественного определения энтерококков с концентрированием пробы воды на мембранных фильтрах.[ ...]
Классическая схема выделения энтерококков из воды складывается из 2—3 этапов: посева исследуемой воды или ее разведений в одну из сред накопления, последующего высева на подтверждающую среду (жидкую или плотную) и подтверждения наличия энтерококков по изменению среды или с помощью микроскопии.[ ...]
В 14-м издании Стандартных методов США (1975) в качестве среды накопления на первом этапе анализа рекомендуется азид-декстрозный бульон. При наличии мути через 24 ч инкубации посева при 35°С делают пересев не менее 3 больших петель в этилфиолетовый азид-ный бульон. При отсутствии мутности инкубацию продолжают до 48 ч. Пробирки с подтверждающим бульоном инкубируют 24 ч при 35°С. Если изменения с подтверждающей среды не произошло, то делают повторный высев из среды накопления, где отмечены признаки роста. Метод Международных стандартов (1973) отличается тем, что инкубацию в азид-декстрозном бульоне производят в течение 72 ч, а в качестве подтверждающей среды используют тот же бульон, но посевы выращивают при температуре 45°С в течение 48 ч.[ ...]
По данным ряда авторов, азидные среды допускают развитие некоторых других грамположительных микроорганизмов, поэтому без высева на твердые среды или микроскопии возможны ложноположительные результаты.[ ...]
Используя термоустойчивость энтерококков, часто рекомендуют повышенную температуру выращивания для второго подтверждающего этапа, выполняемого в жидких средах. Однако, как указывается в Унифицированных методах СЭВ (1975), при этом возможны неоправданные отрицательные результаты.[ ...]
В целях «оживления» энтерококков Allen с соавт. (1953), Childs с соавт. (1947) предложили первоначально выращивать посевы в оптимальных углеводных бульонах без ингибиторов при 34°С в течение 2 ч, после чего в среду вводят азид натрия в концентрации 0,025% и продолжают выращивание при 45°С в течение 48 ч, затем учитывают результат. Метод одноэтапный, повышает высе-ваемость энтерококков из воды. Однако необходимость вносить ингибитор в каждую засеянную пробирку усложняет анализ, поэтому широкого распространения метод не получил.[ ...]
Вернуться к оглавлению