Предстационарная кинетика обладает рядом преимуществ с практической точки зрения. Она имеет дело с очень простыми по сути процессами; например, с ее помощью определяют стехиометрию процесса, в ходе которого происходит «всплеск» концентрации продукта, находят константы скорости переноса связанных с ферментом промежуточных соединений на второй субстрат или исследуют индуцируемые лигандами конформационные изменения в белках. Кроме того, характеристики процессов первого порядка (которые обычно изучают) не зависят от концентрации фермента в отличие от констант скорости, измеряемых в стационарной кинетике. Для исследования быстрых реакций требуются очень высокие концентрации ферментов, но их значения близки к концентрациям in vivo. Более того, аналогичные концентрации обычно используются при прямом определении физического состояния белка, что позволяет получать, например, данные об агрегации в условиях, при которых протекает реакция.[ ...]
Данные предстационарной кинетики основаны на прямых измерениях, а прямые данные всегда предпочтительнее косвенных, особенно если учесть неопределенности, возникающие обычно при интерпретации данных стационарной кинетики (разд. Б.4).[ ...]
Вернуться к оглавлению