За исключением ЯМР, с помощью которого удается измерить концентрации свободного и связанного лиганда, спектроскопические методы обычно не позволяют прямо определить число связанных молекул лиганда. При связывании лиганда в спектре происходят изменения, позволяющие найти лишь долю связанного белка, и, не имея дополнительной информации, нельзя установить число присоединившихся молекул лиганда. Типичным примером такого рода является изменение в спектре флуоресценции белка или в спектре флуоресценции или поглощения лиганда, вызываемое присоединением лиганда к ферменту. Обычно в таких опытах добавляют возрастающие количества лиганда к относительно разбавленному раствору белка и строят график зависимости изменения какого-либо параметра спектра от количества добавленного лиганда. Если связываемый лиганд не является хромофором, то исследуют конкурентное ингибирование процесса присоединения лигандов-хромофоров.[ ...]
Вернуться к оглавлению