Как указывалось в гл. 3, Км для ферментативных реакций не всегда равна константе диссоциации фермент-субстратного комплекса; она может быть меньше или больше этой величины в зависимости от того, происходит накопление промежуточных соединений или выполняется механизм Бриггса — Холдейна. Чтобы на основании результатов стационарной кинетики определить константы диссоциации фермент-субстратных комплексов, необходимо либо вводить какие-то допущения о механизме реакции, либо постараться получить дополнительные данные. Более ценную информацию дает предстационарная кинетика, поскольку в этом случае стадии химического превращения субстрата и стадии связывания часто можно разграничить.[ ...]
Константы диссоциации для конкурентных ингибиторов легко определить из опытов по ингибированию, используя уравнение (3.32). Это уравнение выполняется независимо от того, является ли Кгл истинной константой диссоциации для субстрата. Сначала следует показать, что ингибирование является конкурентным; для этого определяют кажущуюся константу Км для субстрата при различных концентрациях ингибитора, а затем из уравнения (3.32) рассчитывают К . Значительные изменения в /См получены только при относительно высоких концентрациях ингибитора.[ ...]
Вернуться к оглавлению