Вирусы растений инактивируются при облучении ультрафиолетом in vitro. Инактивация имеет место при дозах излучения, которые не влияют на основные физические, химические и серологические свойства вирусной частицы. Реакция инактивации характеризуется кинетикой первого порядка, однако, как подчеркивал Клечковский [989, 991], это не обязательно означает, что вирусная частица инактивируется в результате поглощения одного кванта энергии. Квантовые выходы для вирусов растений (и для других вирусов) невелики [989]. Так, в среднем для инактивации частицы ВТМ требуется, чтобы она поглотила 15 000—30 000 квантов, а для инактивации частицы вируса южной мозаики фасоли — примерно 9000 квантов [1363]. Клечковский [989] предположил, что в результате вызываемого облучением возбуждения в различных частях молекулы она переходит в некоторое неравновесное состояние, в котором инактивация может произойти в любой момент времени. Поглощенная энергия может вызвать либо временное, либо постоянное изменение (последнее может быть летальным или нелетальным) или же она может рассеяться в виде тепла.[ ...]
Различными авторами было показано, что скорость инактивации снижается при использовании концентрированных растворов вирусов. Как полагали Боудэн и Клечковский [108], этот эффект обусловлен тем, что при высокой концентрации меньшее количество ультрафиолета поглощается на одну частицу вируса в единицу времени. С другой стороны, было найдено, что инактивация РНК ВТМ не зависит от концентрации РНК, но на этот процесс оказывает влияние концентрация ионов в среде, в которой проводится облучение [509].[ ...]
Заключенная внутри вируса РНК в значительной степени защищена от инактивации облучением при длинах волн 280 и 254 нм; в то же время при длине волны 230 нм чувствительность РНК, находящейся в составе вируса, сходна с чувствительностью изолированной РНК.[ ...]
В отличие от ВТМ вирусу некроза табака не присуща значительно большая устойчивость к инактивации ультрафиолетом, чем свободной РНК. При сравнении спектров действия инактивации ультрафиолетом штамма вируса некроза табака и изолированной из него РНК было установлено, что они очень сходны с ультрафиолетовым спектром поглощения РНК [941] (фиг. 58).[ ...]
Таким образом, инактивация ультрафиолетом происходит одинаково независимо от того, находится ли РНК внутри или вне вирусной частицы.[ ...]
Облучение листьев, зараженных ВТМ, соответствующими дозами ультрафиолета позволяет инактивировать центры инфекции. Устойчивость к инактивации увеличивается со временем, прошедшим после заражения. Кинетику инактивации использовали при попытках исследовать процессы, протекающие на рашшх этапах после заражения (гл. VII).[ ...]
Относительно действия ультрафиолета на вирус в разные моменты после проникновения вируса в растение известно мало. При коротких воздействиях ультрафиолета на растения табака, системно инфицированных У-вирусом картофеля, происходит инактивация большей части вирусных частиц, находящихся в эпидермисе, однако основная масса вируса в листе остается неповрежденной [239, 254]. Верхний эпидермис N. glutinosa пропускает 25—-50% падающего на пего излучения с длиной волны 254 пм [147], так что при дозах, не летальных для растения, излучение практически не проникает в нишерасположенные ткани листа.[ ...]
В отличив от ВТМ интактпый вирус некроза табака и PIIK вируса некроза табака в одинаковой степени поддаются реактивации при действии дневного света на зараженные растения [941]. Степень фотореактивации: после инактивации ультрафиолетом не зависела от длины волны инактивирующего света в диапазоне 230—290 нм.[ ...]
Фотореактивация не может иметь места непосредственно после заражения облученным вирусом. Так, чтобы большая часть частиц Х-вируса картофеля достигла того состояния, при котором они могли быть «спасены» видимым светом, требовалось около 30 мин. После этого 30-мипутпого периода освещение дневным светом в течение 15 мин приводило к почти полной фотореактивации [109]. Частицы Х-вируса картофеля, находившиеся в зараженных листхэях, которые выдерживали в темноте в течение 1 ч после заражения, сохраняли свою способность к реактивации, но если этот период был более продолжительным, они становились биологически: инертными. Облученная РНК вируса некроза табака поддается фотореактивации почти сразу после заражения и сохраняет эту способность приблизительно в течение часа [109, 112].[ ...]
Рисунки к данной главе:
Спектры поглощения в ультрафиолете (правая ось ордшшт) и спектры действия инактивации ультрафиолетом (левая ось ординат) вируса некроза табака и изолированной |