Метод отделенных листьев удобен в тех случаях, когда для экспериментов требуется большое количество листовой ткани. Черешки листьев можно поместить в воду или в питательный раствор. Правда, в этих условиях листья ■обычно довольно сильно различаются по количеству поглощаемой ими жидкости. Кроме того, они могут неожиданно оказаться увядшими. С другой стороны, этот метод сводит к минимуму такую проблему, как рост микроорганизмов в ткани во время инкубации. Чаще листья помещают во влажную камеру, закрытую стеклом. Инокулировашше и пеииокулиропашше половинки листьев можно инкубировать раздельно [748]. При этом приходится считаться ■с возможностью роста бактерий, грибов и простейших. Было, например, показано, что стерильные и нестерильные листья редиса различаются по интен-сивности включения : аР-ортофосфата в нуклеиновые кислоты [301].[ ...]
Исследовалась возможность изучения репликации ВТМ в полосках эпидермиса, отделенных от листа непосредственно после инокуляции и плавающих на поверхности питательного раствора или дистиллированной воды [462]. В таких полосках эпидермиса через 21—45 ч после инокуляции наблюдалось повышение инфекционности; через 50 ч, однако, инфекционпость снова снижалась. Удавалось также инокулировать вирусом табачной мозаики нижшою поверхность полосок эпидермиса, снятых со стебля томатов [787]. Обычно во влажных условиях полоски эпидермиса сохраняют жизнеспособность в точение нескольких дней.[ ...]
В принципе суспензии живых, но не делящихся клеток обеспечивают экспериментатору ряд преимуществ при изучении репликации вирусов; однако на практике действительно эффективной системы такого рода до сих пор предложено не было. Можно использовать также разобщенные клетки из ткани каллюса, растущие в культуре, или клетки листьев, разделенные ферментативной обработкой [1972]. Включение радиоактивных предшественников в ВТМ исследовалось на группах клеток из листьев [300]. С этой целыо инфицированные листья измельчали при контролируемых условиях так, чтобы от 30 до 50% клеток оставались интактными. В этих гомогенатах синтезировался меченый вирус. Изменения, вызываемые в клетках гомогенизацией, вероятно, довольно серьезны, однако они не были изучены.[ ...]
Вернуться к оглавлению