При механической инокуляции инфекционный вирус или вирусная РНК вводятся в клетки через повреждения, вызванные тем или иным способом на поверхности растения. При этом, если вирус способен репродуцироваться в клетке, развивается инфекция. Этот способ передачи вирусов имеет большое значение для многих разделов экспериментальной вирусологии, особенно для различных методов количественного определения вирусов (гл. И), а также при изучении ранних этапов взаимодействия вируса с чувствительными клетками (гл. VII). Использование вирусной РНК в качестве инокулума мы рассматривали в гл. IV, а различные факторы, влияющие на чувствительность растений-хозяев к вирусам, рассмотрим в гл. XII.[ ...]
Для нанесения инокулума на лист могут быть применены пульверизаторы типа используемых художниками. Они полезны в тех случаях, когда следует инокулировать большое число листьев одним и тем же ипокулумом, однако при этом необходима достаточно тщательная стандартизация величины давления воздуха и расстояния до поверхности листа. Иногда применяется инъекция инфекционного материала в черешок листа или в стебель с помощью шприца, но обычно этот способ оказывается малоэффективным. Во избежание необходимости мытья пестиков, ступок и другой стеклянной посуды в тех случаях, когда требуется произвести много индивидуальных инокуляций, можно растереть кусочек больного листа непосредственно иа листе опытного растения [1250].[ ...]
Эффективность механической инокуляции значительно возрастает, когда какой-то абразив добавляют к инокулуму или посыпают им поверхность листа перед инокуляцией. В качестве абразивов наиболее широко применяют карборунд (400—500 меш) и диатомовую землю, например целит. Степень увеличения числа местных поражений, возникающих в результате использования абразивов, варьирует в зависимости от вида растения-хозяина и вируса, но в ряде случаев число некрозов возрастает в 100 и более раз. Если инокулум обладает низкой инфекционностью, использование абразивов бывает необходимым для успешного инфицирования. Важное значение может иметь момент добавления абразивного материала. Так, например, оказалось, что целит, добавленный после гомогенизации и разведения инфекционного материала, гораздо более эффективен, чем при его добавлении перед гомогенизацией [1965].[ ...]
Абразивные материалы — это единственные повсеместно применяемые добавки, однако в некоторых случаях (определенные вирусы и растения-хозяева) увеличение числа местных поражений можно наблюдать и при использовании других веществ. Так, когда к инокулуму некоторых вирусов добавляют раствор двузамещенного фосфорнокислого калия (1%), заметно увеличивается их инфекциоиность в отношении листьев фасоли [1954], причем влияние фосфата было наибольшим, когда его использовали совместно с абразивом (фиг. 17).[ ...]
Ярвуд [1963] обнаружил, что в случае ряда вирусов быстрое высушивание листьев после инокуляции либо струей воздуха, либо каким-то гигроскопичным материалом приводит к заметному увеличеншо числа местных поражений. Возможно, это связано с тем, что вода в процессе инокуляции оказывает вредное действие на чувствительность растения. Влияние высушивания значительно варьирует в зависимости от вида растения-хозяина и, как было показано, при некоторых условиях приводит к 100-кратному увеличению числа местных поражений. Наиболее отчетливо действие высушивания проявляется в первую секунду после инокуляции, а затем оно быстро надает (фиг. 18).[ ...]
Вернуться к оглавлению