Вирусные препараты, прошедшие одну стадию очистки и концентрирования, еще содержат некоторое количество низко- и высокомолекулярных веществ, происходящих из ткани хозяина. Большая часть этих примесей может быть удалена на дальнейших стадиях очистки. Метод, который следует при этом использовать, в значительной степени зависит от стабильности вируса, количества выделенного препарата и цели, для которой требуется препарат.[ ...]
Иногда препараты вируса высокой степени чистоты можно получить путем повторного применения одного и того же метода. Например, иногда препарат можно подвергнуть повторной кристаллизации с помощью сульфата аммония или провести несколько циклов дифференциального центрифугирования. Последний метод предпочтителен для удаления макромолеку-лярных примесей, так как они не растворяются при ресуспендировании осадка, полученного после высокоскоростного центрифугирования. Однако при этом часто наблюдаются и потери вируса, что происходит либо вследствие того, что часть вируса или весь он становится нерастворимым, либо из-за того, что для растворения осадка было недостаточно времени.[ ...]
Последнее обстоятельство представляет особую трудность при выделении некоторых палочкообразных вирусов. При растворении небольших осадков, для которых характерно высокое отношение поверхности к объему, серьезные потери могут иметь место вследствие того, что вирус вновь переходит в раствор еще до удаления надосадочной мощности.[ ...]
Вообще говоря, в процессе выделения полезно использовать сочетание по крахотей мере двух методов, которые зависят от разных свойств вируса. По-видимому, для удаления примесей это более эффективный прием, чем повторное применение одного и того же метода.[ ...]
Вернуться к оглавлению