Осадок белка в пробирке растворяют в щелочи, для этого при» ливают 5 см3 1 н ЫаОН, растирают стеклянной палочкой и разбавляют раствор водой до 0,1 н. концентрации по щелочи. Количество воды можно рассчитать по контрольной пробирке без осадка. Далее раствор фильтруют через бумажный или стеклянный фильтр для отделения клетчатки, песка и других примесей.[ ...]
Объем фильтрата в мерных пробирках доводят до определенного объема 0,1 н. раствором ЫаОН. Белок определяют в фильтрате по Лоури. При высоком содержании белка в навеске готовят разведение, используя для этого 0,1 н. раствор ЫаОН.[ ...]
При анализе тканей и препаратов, содержащих хлорофилл, необходимо обесцветить осадок белка, так как его производные, образующиеся в щелочной среде, мешают колориметрированию. Для этого в пробирку к осадку промытого белка добавляют 4-5 см3 85%-го ацетона или смеси ацетон-спирт в соотношении 2:1, перемешивая стеклянной палочкой. Смывают осадок с палочки небольшим объемом того же раствора.[ ...]
Для экстракции пигментов оставляют пробирки на 15-20 мин. Затем содержимое пробирки центрифугируют, при этом пигменты переходят в раствор, а белковый осадок обесцвечивается. Окрашенный растворитель отбрасывают, сливая по возможности полно. Остатки растворителя можно упаривать под тягой, небольшие количества спирта и ацетона не мешают определению.[ ...]
Осадок белка растворяют 1 н. раствором ЫаОН. Если он плотный и плохо растворяется, увеличивают прилитый объем щелочи и слегка нагревают пробирки в кипящей водяной бане 10 - 15 мин. Перед фильтрованием доводят концентрацию щелочи до 0,1 ни фильтруют через бумажный или стеклянный фильтр в мерную колбу или пробирку. Объем фильтрата доводят до метки 0,1 н. щелочью.[ ...]
Вернуться к оглавлению