Процесс осаждения белкового азота можно ускорить, используя в качестве осадителя 50%-ю трихлоруксусную кислоту (СС13СООН), при этом сильно снижается объём осадка. Метод широко применяется при массовых анализах.[ ...]
Осаждённый белок оставляют на 0,5 - 1 ч, затем фильтруют через беззольный рыхлый фильтр методом декантации, промывая осадок в стакане и на фильтре небольшими порциями 2%-й трихлоруксусной кислоты. Общий объём промывного раствора 200 см3. Осадок полностью переносят на фильтр.[ ...]
Отмытый белок на фильтре прямо с воронкой подсушивают в термостате при температуре 50 - 60°С примерно 1 час. Когда фильтр начнёт отставать от воронки, его осторожно сворачивают в трубочку и опускают на дно колбы Кьельдаля. Приливают, в зависимости от размера навески и величины фильтра, 10-20 см3 Н2804 (конц.) цилиндром или автоматической пипеткой. Горло колбы закрывают стеклянной круглой пробкой которая предохраняет кислоту от выкипания. При этом за счёт процесса дегидратации под влиянием концентрированной серной кислоты происходит «обугливание» фильтра и белкового остатка. Чёрная пористая масса в колбе постепенно разжижается при нагревании. Если этого не происходит, в колбу следует добавить ещё 5-7 см3 концентрированной серной кислоты.[ ...]
Первоначально озоление ведут при комнатной температуре до полного разрушения фильтра, слегка подогревая колбу на электроплитке, пока её содержимое не приобретёт однородную густо-масляную консистенцию коричнево-бурого цвета. Для равномерного озоления колбу, залитую, кислотой лучше оставить на ночь.[ ...]
Колбу помещают на электроплитку или в специальный электронагреватель. Вначале процесс озоления ведут на слабом огне, используя регулировку печи реостатом или подкладывая под колбу асбест. Нельзя допускать, чтобы вспенивающаяся масса поднималась вверх по горлу колбы. Если на горле колбы оказались углистые частицы или возникло небольшое вспенивание, колбу охлаждают и смывают их осторожно каплями серой кислоты из пипетки. В колбу добавляют один из катализаторов после того, как раствор в колбе станет однородным. Озоление следует проводить при равномерном, но не бурном кипении серной кислоты, чтобы избежать потерь азота, периодически осторожно взбалтывая колбу.[ ...]
Биологическая ценность растительных белков во многом зависит от состава и соотношения белковых фракций, которые извлекают различными растворителями. Суммарный белок разделяют на альбумины, глобулины, проламины, глютелины. Главнейшие таксоны культурных растений характеризуются специфическим соотношением этих фракций. Известно, что биологическое и технологическое качество пшеницы в основном определяется проламинами и глютелинами, а у зернобобовых культур проламины почти отсутствуют. Интерес к анализу белковых фракций в основном определяется тем фактом, что по соотношению фракций можно косвенно оценивать аминокислотный состав данного белка, не переходя к анализу аминокислот.[ ...]
Установлено, что сумма незаменимых аминокислот выше в альбуминах и глобулинах; проламины пшеницы и особенно кукурузы не содержат крайне важных для человека и животных лизина, метионина, триптофана, что снижает биологическую ценность этой фракции. Все процессы созревания и налива зерна тесным образом связаны с изменением соотношения белковых фракций, обычно снижается в белке доля низкомолекулярных белков альбуминов и глобулинов и увеличивается доля проламинов и глютелинов.[ ...]
Азот минеральных удобрений, внесенный в виде подкормки, в основном переходит в белок спирторастворимой фракции.[ ...]
Аминокислотный состав белка под влиянием удобрений и других факторов не меняется, но сумма незаменимых кислот может возрастать и снижаться за счет различного соотношения фракций.[ ...]
Влияние агрохимических приемов и почвенно-климатических условий на фракционный и аминокислотный состав растений оценивается методом фракционного анализа белка, предложенного Ермаковым и модифицированного впоследствии многими авторами. Метод позволяет анализировать в основном белки семян.[ ...]
Вернуться к оглавлению