Гидролазы представлены весьма обширной группой ферментов. Наибольшее значение имеют те из них, которые расщепляют сложноэфирные, глюкозидные, пептидные, кислотно-ангидридные и некоторые другие связи в органических соединениях. Участвуя в реакциях гидролитического распада высокомолекулярных органических соединений, они играют, важную роль в обогащении почвы подвижными и доступными растениям и микроорганизмам питательными веществами.[ ...]
В составе растительных остатков и микробных тел в почву поступает значительное количество белковых веществ, аминокислот и других азотсодержащих органических соединений. В превращении этих соединений большую роль играют присутствующие в почве протео-литические и дезаминирующие ферменты. В результате процессов последовательного протеолитического расщепления до аминокислот и распада под действием амидогидролаз и дезаминаз с выделением аммиака, азот белковых веществ превращается в доступную для высших растений форму. Это явление известно как процесс аммонификации.[ ...]
При определении активности протеаз в почве в качестве субстрата обычно применяют казеин, желатин и некоторые пептиды.[ ...]
Принцип метода основан на учете количества аминокислот, образующихся при протеолизе внесенных в почву белков путем связывания их в окрашенные комплексы.[ ...]
На технических весах берут навеску почвы 2 г в колбу Эрлен-мейера на 50 смл. Приливают 10 смл 1% раствора желатина или казеина, приготовленного на фосфатном буфере (pH 7,4) и 0,5 см" толуола. Колбу закрывают корковой пробкой, взбалтывают на ротаторе 3 мин и ставят в термостат на 24 ч при температуре 30°С. По истечении времени содержимое колбы фильтруют.[ ...]
Еще раз фильтруют раствор в пробирку, прибавляют пипеткой 1 смл 2%-го раствора нингидрина, взбалтывают.[ ...]
Пробирку с раствором нагревают в кипящей водяной бане в течение 10 мин. Окрашенный раствор из пробирки переносят в мерную колбу на 50 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки, перемешивают.[ ...]
Построение калибровочной шкалы. Чистый глицин (0,1 г) растворяют в 100 см3 дистиллированной воды. 1 см3 этого раствора содержит 1 мг глицина. Из основного раствора берут в мерные колбы на 50 см3 2, 4, 6, 8, 10 см3 раствора, добавляют все реактивы, как описано выше, окрашивают нингидрином.[ ...]
Смешать 800 см3 раствора «а» и 200 см3 раствора «б».[ ...]
СО(ИН2)2 -> 2 NN3 + С02 + Н20 Мочевина попадает в почву в составе растительных остатков, навоза и как азотное удобрение. Она образуется и в самой почве в качестве продукта превращения азотистых органических соединений -белков и нуклеиновых кислот.[ ...]
Вернуться к оглавлению