Фотсшетрические методы анализа составляют один из разделов абсорбционного анализа, основанного на способности веществ к избирательному поглощению энергии световых потоков определенных длин волн. Между поглощением энергии и количеством поглощающего вещества в исследуемом растворе существует зависимость, известная как закон Бугера—Ламберта—Бера.[ ...]
В 1729 г. Бугер установил и в 1760 г. Ламберт подтвердил так называемый первый закон светопоглощения: относительное количество поглощенного пропускающей средой света не зависит от интенсивности падающего излучения. Каждый слой равной толщины поглощает одинаковую долю проходящего монохроматического потока световой энергии.[ ...]
В 1852 г. Бер установил второй закон светопоглощения, связывающий величину поглощения с концентрацией вещества: поглощение световой энергии пропорционально числу молекул вещества в поглощающем слое.[ ...]
Величина коэффициента молярного погашения является объективной характеристикой способности исследуемого вещества поглощать энергию светового потока при данной длине волны.[ ...]
Оптическая плотность и молярный коэффициент погашения зависят от длины волны падающего светового потока. Эта зависимость (И — X или е — Я) называется абсорбционной кривой, или кривой поглощения. В видимой области спектра абсорбционная кривая может иметь один или больше максимумов, а в некоторых случаях (даже при наличии видимой окраски раствора) такие максимумы могут отсутствовать. Длину волны, соответствующую максимуму, обозначают Амакс, а коэффициент молярного погашения при этой длине волны емакс. Значение еМакс обычно используют в качестве объективной оценки чувствительности реакции, на которой основан тот или иной фотометрический (или спектрофотометрический) метод.[ ...]
Зависимость оптической плотности раствора от концентрации окрашенного продукта колориметрической реакции и соответственно от концентрации исследуемого вещества в некотором интервале концентраций может быть линейной. В таких случаях говорят, что растворы в данном интервале концентраций подчиняются закону Бугера—Ламберта—Бера.[ ...]
При использовании того или иного фотометрического метода рекомендуется предварительно определить пределы концентраций, при которых измеряемые растворы подчиняются закону Бугера— Ламберта—Бера. Это достигается построением так называемой «калибровочной кривой» (зависимость оптическая плотность — концентрация).[ ...]
ФЭК-М — наиболее простой из рассматриваемых здесь приборов.[ ...]
Порядок работы. Перед тем как приступить к измерениям, необходимо убедиться в исправности прибора. Сначала проверяют .правильность установки осветителя. Для этого за 15—20 мин до начала работы включают лампу. Проверку равномерности светового потока и заполнения окна измерительной диафрагмы и нейтральных клиньев производят следующим образом. Прикрывают светофильтры папиросной бумагой и регулировочными винтами осветителя (лампы) устанавливают его так, чтобы изображение нити лампы было четким (резким) и расположено в центре светофильтра. Затем при закрытой шторке устанавливают механический нуль гальванометра (арретир в положении «открыто») и приступают к измерениям оптической плотности исследуемых растворов по правому или левому отсчетному барабану.[ ...]
При измерении по правому барабану устанавливают его на деление 0 (щель диафрагмы имеет наименьшую ширину. Шторка закрыта, гальванометр в положении 0). В оба канала на одинаковом расстоянии от входного отверстия (окна) устанавливают кюветы с растворителем.[ ...]
Рисунки к данной главе:
| Оптическая схема спектрофотометра СФ-4. |
 |