Качественная идентификация производится по «длине пробега» соответствующих пятен, специфичной для каждого вещества при соблюдении установленных условий опыта. Эта величина, обозначаемая символом Я/, представляет собой отношение расстояния от стартовой линии до центра пятна к расстоянию от стартовой линии до линии фронта, достигнутой растворителем. Оба расстояния измеряют по окончании разделения смеси. Для сравнения служит параллельный опыт на той же пластинке со смесью известных веществ.[ ...]
Полуколичественный результат можно получить по размеру пятна сравнением с размерами пятен, образовавшихся в параллельных опытах, проведенных с известными концентрациями того же вещества. Грубо приближенно можно принять, что между размером пятна и количеством вещества имеется логарифмическая зависимость, т, е. вдвое большее пятно соответствует 10-кратному количеству вещества.[ ...]
Значительно более точные результаты получаются измерением интенсивности окраски пятна. При этом фотометрически измеряют ослабление света, проходящего через пятно светового потока. Источник света должен быть расположен перпендикулярно пятну. При нанесении на график значений изменения интенсивности потока получается колоколообразная кривая, ограниченная ею площадь характеризует количество вещества. С помощью эталонных растворов с известными концентрациями растворенного вещества можно построить соответствующую калибровочную кривую. Если носитель непрозрачный (например, алюминиевая фольга), то интенсивность окраски пятен измеряют на фотометре в отраженном свете. Аналогично этому с помощью новейших приборов (например, фирмы Камаг) можно количественно оценить флуоресценцию или гашение флуоресценции. Можно также использовать спектрофотометр РМСЩ фирмы Цейс.[ ...]
Другой способ, значительно более трудоемкий, — после нанесения окрашивающего реактива на тонкий слой пятна соскабливают выделенное вещество, экстрагируют и измеряют светопогло-щение полученного раствора.[ ...]
Вернуться к оглавлению