Метод определения фагов кишечных палочек прост, не требует специального оборудования и дефицитных реактивов, ответ получается через 18—24 ч.[ ...]
Перед определением пробу воды в объеме 30 мл освобождают от микрофлоры. Из существующих методов (центрифугирование, фильтрование через мембранные фильтры № 2 или 3, обработка хлороформом) последний прием является наиболее простым и вместе с тем щадящим в отношении фагов. На каждый миллилитр пробы добавляют 1 каплю хлороформа, энергично встряхивают и отстаивают в течение 30 мин. Хлороформ оседает на дно, а фаги остаются в жидкости над хлороформом.[ ...]
А. И. Мельникова (1974) для облегчения обнаружения и подсчета мелких и слабо очерченных бляшек применила окраску слоев агара реактивом Гимзы, метиленовым синим и ТТХ. Резко очерченные бляшки на розово-красном фоне были получены при окраске ТТХ (чашки после инкубации 18 ч при 37°С заливали мясо-пептонным бульоном с 0,1% раствором ТТХ и выдерживали в течение 20 мин, затем бульон сливали).[ ...]
При необходимости исследования чистой воды, например питьевой, используют метод подращивания. К исследуемой воде добавляют мясо-пептонный бульон с густой взвесью эталонного штамма E. coli в количестве, в 10 раз превышающем объем воды. Посев инкубируют при 37°С 24 ч. Подтверждают наличие фага во взвеси выделением бляшек по методу Грация.[ ...]
А. И. Мельникова (1974) предложила выращивать посев на мембранном фильтре на 1,5% питательном агаре в течение 18 ч с последующей заливкой на 20 мин 0,1% бульонным раствором ТТХ для окрашивания газона E. coli. Бляшки четко видны на розово-красном газоне E. coli и бело-розовом мембранном фильтре.[ ...]
Вернуться к оглавлению