Стандартный метод определения числа сапрофитных микроорганизмов за многие годы применения в практике санитарно-бактериологического анализа не претерпел существенных изменений. Это связано, вероятно, с тем, что этим методом определяют не какую-либо таксономическую единицу, а группу микроорганизмов, объединяемых едиными требованиями к условиям питания, температуре инкубации, близким по интенсивности развития при этих условиях. Сравнимые результаты могут быть получены только при строгом соблюдении всех условий метода — стандартная питательная среда, единая температура и сроки выращивания.[ ...]
При нарушении этого правила нормативы качества воды по сапрофитам потеряют ценность, поэтому допустимы только такие модификации метода, которые не скажутся на количестве подлежащих учету колоний. Новый или усовершенствованный метод может быть рекомендован к практическому использованию только после сравнительной его оценки со стандартным при статистически недостоверной разнице получаемых результатов.[ ...]
Ю. Т. Лошаков (1962) выращивал сапрофитные микроорганизмы, сконцентрированные из воды на мембранных фильтрах, на питательном агаре. После инкубации посевов при 37°С в течение 24 ч и при 20°С — 48 ч фильтры с выросшими колониями переносили на смоченную 1% раствором ТТХ фильтровальную бумагу, вложенную в чашку Петри. При дополнительной инкубации этих чашек в течение 90 мин при той же температуре, при которой происходило выращивание посевов, выросшие колонии окрашивались в ярко-красный цвет и легко подсчитывались.[ ...]
Метод мембранных фильтров (по Л. Е. Корш). Л. Е. Корш (1970) предложила модифицированный питательный агар с ТТХ для определения сапрофитных микроорганизмов с помощью мембранных фильтров в полевых и экспедиционных условиях. Применение мембранных фильтров для выделения сапрофитов из воды значительно сокращает расход посуды, питательной среды и дает экономию рабочего времени.[ ...]
Фильтрацию воды через мембранный фильтр проводят без фильтровального прибора. Необходимый объем воды при помощи пипетки постепенно и равномерно наносят на поверхность мембранного фильтра, помещенного в чашку Петри на подкладку из нескольких слоев стерильной фильтровальной бумаги, которая впитывает воду, прошедшую через мембранный фильтр. Мембранный фильтр затем пинцетом перекладывают на чашки Петри с питательным агаром с 0,0005% ТТХ. ТТХ вводят в расплавленный агар перед его использованием. Колонии на мембранных фильтрах выращивают при 37°С в течение 24 ч. ТТХ в питательном агаре выполняет роль красителя для окрашивания колоний и получения достаточной контрастности, что облегчает и ускоряет подсчет. Для большей точности результатов счет колоний целесообразно проводить с помощью стереоскопического микроскопа.[ ...]
Для облегчения и уточнения счета рекомендуется дополнительное проявление колоний. Для этого мембранные фильтры с выросшими на них колониями помещают на 10—15 мни при 37°С на фильтровальную бумагу, смоченную 2% раствором ТТХ. Колонии хорошо окрашиваются и принимают более яркий цвет — от розового до вишневого, а сам фильтр остается белым, что обеспечивает хорошую контрастность.[ ...]
Метод мембранных фильтров позволяет при необходимости дифференцировать выросшие микроорганизмы по различным признакам, что перспективно для более глубокого изучения видового состава сапрофитных бактерий.[ ...]
Оценка качественного состава сапрофитной микрофлоры может быть дана и при посеве на поверхность питательного агара в количестве 0,1 мл испытуемой воды или соответствующего разведения с последующим растиранием шпателем. В этом случае ТТХ или реактив для ок-сидяяного теста накапывают на выросшие колонии на всю поверхность чашки или на секторы при густом по-севе.[ ...]
Подробную качественную и количественную характеристику различных групп сапрофитных микроорганизмов можно использовать для дополнения и уточнения санитарной оценки водоемов. Преобладание кокковых бактерий свойственно чистым водоемам. Палочковидные формы преобладают в водах, более богатых растворенными органическими веществами. О загрязнении воды частицами почвы свидетельствуют колонии Вас. тусоь с!ез — волокнистые нити, быстро разрастающиеся по поверхности агара. Актиномицеты, также характерные обитатели почвы, образуют плотные небольшие колонии из тонких ветвящихся нитей, при более длительном выращивании покрытых мучнистым налетом из конидий. Среда вокруг них приобретает различную окраску. Актиномицеты могут придавать воде трудно устранимые при очистке землистые запахи. Плесневые грибы свидетельствуют о загрязнении воды из воздуха. Некоторые специфические микроогранизмы могут быть показателями загрязнения воды сточными водами от отдельных производств, например, колонии дрожжеподобных грибов.[ ...]
Вернуться к оглавлению