Полученный из осадка раствор засевают на плотные элективные питательные среды соответственно предполагаемому виду микроба, а именно: висмут-сульфит агар для обнаружения бактерии брюшного тифа и паратифа В; Эндо — для бактерий паратифа А; бакто-агар Плоскирева или среду Левина — для бактерий дизентерии. Жидкость, внесенную на поверхность каждой питательной среды в количестве 0,25 мл, равномерно распределяют в чашке стерильным шпаделем. После посева чашки помещают в термостат. Для испарения жидкости крышки чашек временно снимают и покрывают их кружками стерильной бумаги. Подсушенные чашки в дальнейшем закрывают крышками и оставляют. а термостате дном кверху.[ ...]
Методом осаждения пользуются при».исследовании сильно загрязненных хозяйственно-бытовых сточных вод и воды открытых водоемов.[ ...]
Метод фильтрации. Пробу воды фильтруют через стерильные мембранные фильтры № 3. В этом случае фильтровальный аппарат должен быть стерильным. Для этого фильтровальный столик, смонтированный на колбе Бунзена, завертывается в бумагу и стерилизуется в автоклаве при 1 атм в течение 20 минут.[ ...]
По окончании фильтрации фильтр снимают пинцетом и помещают в чашку на поверхность плотной элективной среды. Осадок с концентрированными на фильтре бактериями снимают с него шпаделем и им же равномерно распределяют по всей поверхности среды. Затем этим же шпаделем (не обжигая его) производят посев еще на 1—2 чашки с такой же или другой элективной средой. При таком посеве получаются изолированные колонии, что ускоряет процесс выделения чистых культур микробов.[ ...]
Можно также с мембранных фильтров сделать отпечатки на плотных элективных средах (Эндо, висмут-сульфитный агар, среда Плоскирева или Левина). Фильтры, снятые с плотной среды, после отпечатков помещают в среды накопления (желчный бульон и др.) с последующим высевом на среду Эндо через 24—48 часов. После отпечатков с фильтра материал распределяют шпаделем равномерно по поверхности питательной среды, как описано выше.[ ...]
Чашки с посевами инкубируют в термостате при 37°С в течение 18—24 часов; посевы на висмут-сульфитном агаре для обнаружения бактерий брюшного тифа выдерживают 36—48 часов. Полученный фильтрат после фильтрования проверяют на стерильность путем посева 1 мл в пробирку с мясо-пептонным бульоном.[ ...]
Из подозрительных колоний делают отсевы (в возможно большем количестве) на скошенный мясо-пептонный агар и короткий пестрый ряд (пробирки с лактозой и глюкозой). Короткий пестрый ряд с успехом можно заменить средой Рееселя, средой с мочевиной или розоловым агаром. Одновременно те же колонии изучают микроскопически (мазок окрашивают по Граму). При наличии материала ставят пробную агглютинацию на предметном стекле со смесью агглютинирующих сывороток в разведении 1:10.[ ...]
Если на плотных элективных средах имеются только единичные подозрительные колонии, то часть колоний снимают петлей и распирают в конденсационной жидкости пробирки с косым агаром и штрихом проводят по его поверхности. Затем небольшое количество этой жидкости используют для посева на среду Ресселя или другие дифференциальные среды.[ ...]
Посевы на дифференциальных средах выдерживают в термостате при 37°С в течение 18—24 часов.[ ...]
При отсутствии подозрительных колоний на плотных элективных средах для получения культуры используют посев материала на жидкой среде накопления. После суточной инкубации из этой среды производят высев на плотные элективные среды.[ ...]
Вернуться к оглавлению