Ферментом, кинетические свойства которого при разных pH изучены лучше, чем свойства остальных ферментов, является химотрипсин; хорошо известны его структурные особенности и механизм каталитического действия. Чрезвычайно широкая специфичность химотрипсина и, следовательно, возможность использования различных субстратов позволяет исследовать простой механизм Михаэлиса — Ментен, механизм с накоплением промежуточных соединений, обнаруживать непродуктивное связывание и анализировать механизм Бриггса — Холдена с изменением природы лимитирующей стадии при варьировании pH.[ ...]
Это редкий случай, когда анализ стационарной кинетики позволяет получить константы скорости для ряда конкретных стадий реакции.[ ...]
Точное определение р/Са фермент-субстратного комплекса из рН-зависимости /См затруднено по двум причинам. Во-первых, изменение /См относительно невелико и требуется высокая точность при получении данных. Во-вторых, необходимо определить две области плато: при низком и при высоком значениях pH. Это означает, что измерение нужно проводить в более широком диапазоне pH, чем при определении £cat или £cat//CM, а при этом возникает опасность появления нежелательных эффектов, обусловленных ионизацией других групп.[ ...]
Вернуться к оглавлению