Минимальное число проб воды, отбираемой из водораспределительной системы для ежемесячного анализа на колиформы, зависит от численности населения, обслуживаемого этой системой. Например, минимальное число проб при населении 1000, 10 000 и 100 000 чел. составляет соответственно 2, 12 и 100. Соответствие качества исследуемой воды бактериологическим требованиям стандартов на питьевую воду определяется числом положительных результатов. При исследовании стандартных проб объемом 10 мл результат считается положительным, если бактерии Coli обнаружены не более чем в 10% случаев в любом месяце. Другими словами, верхний предел количества колиформ должен в среднем составлять 1 на 100 мл.[ ...]
Колиформная группа бактерий определяется как совокупность аэробных и факультативно-анаэробных, неспорообразующих, грамотри-цательных палочек, вызывающих брожение лактозы с образованием газа в течение 48-часовой инкубации при 35°С. Первоначальный анализ на колиформы — предположительный, он основан на выделении газа из лактозы. Десятимиллилитровые порции водной пробы переносят с помощью стерильных пипеток в подготовленные бродильные трубки. Трубки содержат лактозу или лауриновую триптозу, бульон и перевернутые ампулы (сборники газа). Инокулированные трубки помещают в термостат с температурой 35±0,5°С. Рост бактерий с выделением газа, обнаруживаемого по появлению пузырьков в перевернутой ампуле, считается положительным анализом, показывающим, что колиформные бактерии могут присутствовать. Отрицательная реакция (отсутствие роста или рост без газа) исключает присутствие бактерий колиформной группы.[ ...]
Присутствуют споры или грамположительные палочки.[ ...]
Исследование воды поверхностных водных источников. В процессе исследований колиформных организмов, проводимых при повышенной температуре, их разделяют на бактерии, имеющие фекальное и нефекальное происхождение. Эта методика применима для определения степени загрязнения вод любых водоемов и сточных вод в процессе их очистки, а также пригодна для проведения общего контроля качества воды.[ ...]
Методику анализа, схематически показанную на рис. 3.7, нельзя использовать для непосредственной изоляции колиформ из воды, но ее применяют как подтверждающую после предположительного анализа. Сначала производят посев замеренного объема пробы в бродильные трубки, содержащие лактозу или лауриново-триптозный бульон. Трубки, в которых наблюдается рост бактерий с выделением газа спустя 24 или 48 ч, используют для инокуляции культуры в среду, содержащую бульон ЕС. В этой среде пробу подвергают инкубации в водяной ванне при температуре 44,5±0,2°С, погружая трубку до верхнего уровня среды. Из-за жестких требований к температурному режиму, необходимому для проведения анализа на фекальные колиформы, стандартные термостаты, обычно используемые в бактериологических анализах, неприемлемы. Рост с выделением газа говорит о присутствии фекальной колиформной группы; если же газ не выделяется, то это свидетельствует об отсутствии последней.[ ...]
При определении качества воды необходимо вычислить количество присутствующих колиформных бактерий, чтобы определить, отвечает ли вода установленным стандартам. Для подсчета положительных колиформных анализов (предположительных, подтверждающих и фекальных) используется множество бродильных трубок. При подсчете применяют метод статистической обработки результатов анализов, проводимых с последовательным разбавлением пробы. Результаты исследований представляют в виде наиболее вероятного числа колиформных бактерий (НВЧ). Например, НВЧ Ю означает, что на 100 мл воды приходится 10 колиформных бактерий.[ ...]
Обычно при определении НВЧ используют стерильные пипетки с делениями, соответствующими 0,1 мл, стерильные склянки для разведения с навинчивающимися крышками, содержащие 99 мл воды, и стеллаж, в каждом из шести рядов которого устанавливают по пять бродильных трубок с лактозным бульоном. На рис. 3.8 показана подготовка анализа. Порции пробы объемом 10 мл помещают с помощью стерильной пипетки в каждую из пяти бродильных трубок, затем вводят по 0,1 мл испытуемой воды в каждую трубку второго набора. Для следующего, более высокого разведения (третьего), требуется только 0,01 мл пробы, которую точно отмерить типеткой невозможно. Поэтому 1,0 мл пробы помещают в склянку для разведения, содержащую 99 мл стерильной воды, и перемешивают. Теперь порции объемом 1,0 мл, содержащие 0,01 мл пробы исследуемой воды, могут быть перенесены пипеткой в третий ряд трубок. В трубки четвертого ряда вводят по 0,1 мл из той же самой склянки для разведения. Далее 1,0 мл пробы из первой склянки для разведения переносят во вторую склянку, содержащую 99 мл стерильной воды, для еще одного 100-кратного разведения. Порции из этой склянки вводят с помощью пипетки в пятый и шестой ряды трубок. После инкубации в течение 48 ч при температуре 35°С трубки исследуют на появление газа и регистрируют число положительных реакций для каждого из последовательных разведений.[ ...]
Индекс НВЧ и границы достоверности для различных комбинаций положительных и отрицательных результатов могут быть определены из табл. 3.1. Первые три графы в таблице отражают число положительных анализов в трубках, содержащих 10-, 1- и 0,1-мл порции пробы. Если в трубки помещают меньшее количество пробы, как; обычно и бывает, в табличные ответы следует внести поправки. Если используют порции пробы объемом 1,0, 0,1 и 0,01 мл, то истинное НВЧ будет в 10 раз больше табличного значения; если объемы пробы составляют 0,1, 0,01 и 0,001 мл, то табличное значение следует умножить на 100 и т. д.[ ...]
В тех случаях, когда в десятикратной серии разведений применяют более трех разведений, при вычислении НВЧ используют результаты лишь трех из них. Первое — это высшая степень разведения, дающая положительные результаты во всех пяти исследовавшихся порциях (при условии, что ни одно более низкое разведение не дает отрицательных результатов), а второе и третье — два следующих по порядку высших разведения.[ ...]
Рисунки к данной главе:
Последовательность проведения анализа на присутствие бактерий .колиформ -ной группы в питьевой воде |
Последовательность проведения анализа для идентификации общей колиформ-нпй группы и фекально-колиформной ¡группы при контроле качества воды |
Подготовка набора бродильных трубок для определения наиболее вероятно-го числа колиформных бактерий в пробе воды из поверхностных источников |