Поиск по сайту:


Работа № 45. Определение токсичности сернистого газа, почв, воды, пестицидов методом высечек листьев (по разрушению хлорофилла)

Как ранее упоминалось (см. работу № 27) содержание хлорофилла в листе - весьма изменчивая величина и с его разрушением связана хлоротичность (исчезновение темно-зеленого цвета и появление желтизны). На круглой высечке листа (в большинстве случаев по краям) по мере длительности опыта нарастают хлоротичные и некротические участки. Это явление можно проследить визуально и довольно быстро определить токсичность того или иного компонента или их суммы в тех или иных сочетаниях, встречающихся в природе. Инкубация высечек производится на 2%-ной сахарозе (питательная среда для большинства биотестовых испытаний) с добавлением токсикантов. Контроль - 2%-ная сахароза.[ ...]

Строят кривые поражения листьев сернистым газом по сравнению с контролем; на оси абсцисс откладывают время экспозиции (час), а на оси ординат - процент пораженной ткани у высечек листа.[ ...]

Количество газа нужной концентрации выше ПДК (см. табл. 3 в приложении), количество реактивов, которые нужно для этого взять, можно рассчитать (Вигоров, 1961). Для этого заранее измеряют объем эксикатора наливанием в него воды мерным цилиндром. Затем рассчитывают, сколько газа необходимо для получения в эксикаторе нужной концентрации, например 0,1% (т. е. по 1 мл газа на каждый литр объема эксикатора). Далее, исходя из того, что одна грамм-молекула газа занимает при нормальных условиях объем 22,4 л, рассчитывают массу нужного объема газа. Затем, исходя из вышеприведенного уравнения и молекулярных весов соединений, рассчитывают навеску сульфита натрия, которые даст требуемое количество газа. Серную кислоту для получения газа берут в количестве 2-3 мл. В учебных целях разумнее использовать более высокие концентрации газов (в несколько раз выше ПДК) и непродолжительные экспозиции.[ ...]

Взятые образцы почв (например, одинаковые типы почв под уличными посадками в разных частях города, различающиеся по загруженности улиц автотранспортом) растирают в ступке и просеивают через мелкое сито. Взвешивают на кальке 10 г почвы в трехкратной повторности, пересыпают в колбочку или стаканчик, приливают 25 мл дистиллированной воды. Энергично взбалтывают 10-15 мин на качалке или вручную, оставляют на ночь. Затем жидкость фильтруют через воронку со складчатым фильтром. Жидкость с колбой стерилизуют в кипящей водяной бане методом погружения и кипячения 10-15 мин, горлышко колбы закрывают фольгой. Охлаждают, затем этой вытяжкой смачивают 2 фильтра до полной влагоемкости. Фильтры стерилизуют вместе с чашками Петри. На фильтры раскладывают диски листьев наземных растений нижней стороной вниз. Повторность трехкратная (по 10 дисков).[ ...]

Взятая для испытаний вода упаривается на водяной бане в 10 раз, ею смачивают 2 фильтра до полной влагоемкости, на которые укладывают диски, высеченные из листьев растений. Чашки Петри с дисками устанавливают в термостат, инкубацию и оценку производят так же, как и в предыдущем опыте. Количество хлорофилла в высечках можно также определить фотометрически.[ ...]

В качестве токсического вещества нужно взять какой-либо пестицид и показать, что разные его концентрации могут проявлять как ингибиторный, так и стимулирующий эффект. Наиболее удобен в этом отношении 2,4 Д, который в малых концентрациях работает как ауксин, а в больших - как гербицид.[ ...]

Исходный раствор пестицида (2,4 Д) разливают в пенициллиновые пузырьки по 5 мл. Последующие растворы приготавливают разбавлением исходного раствора. Например, 1 мл 10:)% раствора и 9 мл растворителя - получается ША% раствор. Каждый взбалтывают, последующий раствор готовят из предыдущего, чем достигаются разные концентрации: 10 5%, 10 7%, 10 ( %.[ ...]

Растворами смачивают 2 фильтра, укладывают в чашки Петри, на фильтры раскладывают диски листьев наземных растений, чашки ставятся в термостат. Наблюдение и учет вариантов, построение графиков производят согласно предыдущим описаниям.[ ...]

Вернуться к оглавлению