Поиск по сайту:


Работа № 41. Биомониторинг атмосферного загрязнения по реакции пыльцы различных растений-индикаторов

Работы, проведенные разными авторами с различными растениями (табак, мышиный горошек, мать-и-мачеха, подорожник, кукуруза, сосны обыкновенная и смолистая, пихты белая и сибирская и др.) показали, что в зоне влияния заводов, автомобильных дорог увеличивается число стерильных растений.[ ...]

Для анализа изготавливают временные давленные препараты пыльцевых зерен; последние обрабатывают ацетокармином по Дженсену (1965). Ацетокармин широко применяется для окраски хромосом. В делящихся клетках хромосомы обычно увеличиваются и хорошо видны в микроскоп. Можно окрашивать как проросшую, так и не проросшую пыльцу (жизнеспособные пыльцевые зерна - красные).[ ...]

Используют также выявление крахмала у пыльцы (реакция с йодом в йодистом калии), наличие которого показывает ее жизнеспособность (синее окрашивание). В ряде случаев окраска может быть от темно-пурпурной до черной. Только что образовавшийся крахмал, который частично гидролизован, будет иметь окраску от красной до светло-пурпурной.[ ...]

Методика определения всхожести пыльцы и роста пыльцевых трубок предлагается согласно У.Х. Смиту (1985). При сборе пыльцы следует учитывать, что у древесных видов выброс пыльцы происходит относительно быстро: за время от нескольких часов до нескольких суток. Собранная пыльца может храниться в холодильнике довольно долго (у отдельных видов хвойных до года и больше).[ ...]

Собранная пыльца хранится в холодильнике в малой стеклянной таре (бюксы, пробирки) до анализа. Затем ее помещают на предметное стекло в каплю ацетокармина, накрывают покровным стеклом и осторожно несколько раз подогревают на спиртовке. По мере испарения красителя его следует добавлять пипеткой под покровное стекло. Когда пыльца размягчится (при надавливании препаровальной иглой на покровное стекло начинает расплываться) нагревание прекратить. Убрать лишний краситель фильтровальной бумагой. Затем кончиком спички или деревянной палочкой легкими ударами по стеклу осторожно раздавить препарат и распределить пыльцу равномерно.[ ...]

Рассмотреть пыльцу в микроскоп при разных увеличениях: в 100 и 400 раз (10x40). Стерильные пыльцевые зерна с реактивом-1 (ацетокармин) будут белого цвета, а фертильные - красного. Наличие крахмала в пыльце: синяя окраска с реактивом-2 свидетельствует о жизнеспособности пыльцы. При оценке можно ввести такую градацию: не окрашено, слабо окрашено, сильно окрашено или балльную (от 1 до 4).[ ...]

Пыльцу можно также проращивать на 15%-ном растворе сахарозы, которым смачивается 2-3 фильтра. Пыльца хвойных может прорасти очень быстро (одни сутки).[ ...]

В стеклянную термостойкую колбу на 100 мл наливают 27,5 мл дистиллированной воды, приливают 22,5 мл уксусной кислоты и насыпают в колбу 1-2 г кармина, затем колбу закрывают небольшой стеклянной воронкой и ставят на водяную баню или очень слабый огонь электроплитки, подложив под колбу асбестовую пластинку. Раствор медленно нагревают и при слабом кипении выдерживают 30-60 мин, охлаждают, фильтруют. Профильтрованный раствор помещают в бутылочку с притертой пробкой, где он может храниться неограниченно долгое время.[ ...]

В 100 мл дистиллированной воды растворяют 2 г йодистого калия, после чего в этом растворе растворяют 0,2 г кристаллического йода.[ ...]

В 100 мл дистиллированной воды вносят 2 г агара, нагревают на кипящей водяной бане до полного растворения. Горячий раствор быстро разливают по 20-30 мл в простерилизованные чашки Петри, дают остыть. Стерилизацию чашек Петри можно проводить в сушильном шкафу 30-40 мин, нагревая его до 200°С.[ ...]

Вернуться к оглавлению