Ни постоянство величины Ушах, ни постоянство соотношения между образующимися продуктами еще не доказывают присутствия промежуточного соединения. Например, оказалось, что в случае щелочной фосфатазы постоянство значения Fmax является артефактом, а кроме того, нельзя сказать a priori, что атака комплекса Михаэлиса акцепторами также не даст постоянного соотношения между образующимися продуктами. Для того чтобы из указанных экспериментов можно было сделать четкий вывод о наличии промежуточного соединения, их необходимо связать с измерением скоростей. При измерении скоростей в рамках стационарной кинетики наиболее благоприятной является такая ситуация, когда промежуточное соединение накапливается. Если выполняются уравнения (7.4) — (7.6), можно сделать четкий вывод о существовании промежуточного соединения. Чрезвычайно полезно сочетание опытов по установлению распределения продуктов с исследованиями предстационарной кинетики (как это было сделано в случае химотрипсина и амидов).
Скачать страницу
[Выходные данные]
