При работе с вновь выделенными вирусами или при попытках выделить их главной задачей является очистка вируса, которая была бы достаточной для того, чтобы идентифицировать инфекционные частицы и по крайней мере предварительно охарактеризовать их. Наиболее удобным в этом случае является метод центрифугирования очищенных препаратов в градиенте плотности сахарозы. После фракционирования можно определить иифек-ционность либо в каждой отдельной фракции, собранной из градиента, либо комбинируя их, если присутствует многокомпонентный вирус. Далее можно снять спектр поглощения в ультрафиолете и исследовать образцы в электронном микроскопе с целью обнаружения характерных частиц. При этом можно пользоваться методом подсчета в капле, который позволяет выявить количественную связь по всему градиенту между инфекционностыо и присутствием во фракциях характерных частиц вируса. Открытие многокомпонентных вирусов, которые описаны в гл. VIII, привело к тому, что оказалось необходимым в первую очередь осторожно интерпретировать результаты, полученные после центрифугирования в градиенте сахарозы (или в других градиентах). Одним из преимуществ экспериментов в градиенте сахарозы является возможность применения относительно небольших количеств вируса. Кроме того, в этом случае можно получить приблизительную оценку коэффициентов седиментации исследуемых веществ. О том, как используется градиент плотности сахарозы для характеристики многокомпонентных вирусов, можно узнать, взглянув на фиг. 39.
Скачать страницу
[Выходные данные]
