Разработка изящной методики «клонирования» ДНК для получения большого количества точных копий специфических фрагментов ДНК (рис. 13.4) открыла в последнее время новые горизонты в изучении структуры, организации и функции генома. Если расщепить двухцепочечную ДИК одним из ферментов «рестрикции» (одной из нуклеаз), специфично узнающих и расщепляющих короткие последовательности нуклеотидов (4— 6 пар), то возникают в высшей степени воспроизводимые фрагменты ДНК. Концы двух цепей ДНК обычно бывают смещены относительно друг друга вследствие специфичности мест разрезания двухцепочечной молекулы, цепи которой комплементарны по составу оснований. Если плазмидную ДНК (саморспли-цирующаяся внехромосомная двухцепочечная ДНК, обычно содержащаяся в бактериальных клетках) расщепить тем же ферментом рестрикции, то концы, образующиеся на исследуемой ДНК и плазмиде, будут одинаковыми, так что в условиях, когда эти ДНК смогут соединиться, фрагменты исследуемой ДНК с низкой частотой будут встраиваться в плазмидную последовательность. ДНК обычно встраивают в плазмидный ген, важный для селекции, такой, как ген устойчивости к антибиотикам, что позволяет содержащим такую плазмиду бактериям расти в присутствии антибиотика.
Скачать страницу
[Выходные данные]
